转染是细胞在一定条件下主动或被动导入外源DNA片段而获得新的表型的过程,从本质上讲和转化没有根本的区别。
转染是什么意思
转染可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染。
瞬时转染是指外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其它调控元件的分析。一般来说,超螺旋质粒DNA转染效率较高,在转染后24-72小时内分析结果,常常用到一些报告系统如荧光蛋白,β半乳糖苷酶等来帮助检测。
稳定转染是指外源DNA既可以整合到宿主染色体中,也可能作为一种游离体存在,尽管线性DNA比超螺旋DNA转入量低但整合率高,外源DNA整合到染色体中概率很小,通常需要通过一些选择性标记反复筛选得到稳定转染的同源细胞系。
无论是转染还是转化,其关键因素都是用氯化钙处理大肠杆菌细胞,以提高细胞膜的通透性,从而使外源DNA分子能够容易进入细胞内部。
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